有機(jī)胺類(lèi)化合物并不是都顯堿性，有可能是中性也可能顯酸性，需要根據(jù)結(jié)構(gòu)式進(jìn)行綜合判斷其性質(zhì)并擬定適合的色譜條件。下面，正規(guī)化工產(chǎn)品公司就為大家來(lái)解答一下！

一、中性有機(jī)胺類(lèi)化合物

該類(lèi)化合物的HPLC方法開(kāi)發(fā)和普通中性有機(jī)物并無(wú)區(qū)別，因其電離傾向很弱，所以無(wú)需使用緩沖鹽，流動(dòng)相用水-有機(jī)相系統(tǒng)即可，色譜柱可以根據(jù)保留情況使用納譜分析ChromCore C18或者ChromCore C8液相色譜柱。

二、酸性有機(jī)胺類(lèi)化合物

該類(lèi)化合物因具有較強(qiáng)的電離傾向，需要使用緩沖鹽，一般來(lái)說(shuō)酸性化合物對(duì)緩沖鹽的緩沖能力要求都不是太高，所以緩沖鹽的濃度可以略低，如0.01-0.02mol/L，在特定情況下，緩沖鹽的pH值也可以偏離pka±1的范圍，如0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（不調(diào)節(jié)pH，約為4.6）。

緩沖鹽的pH值需要偏離待測(cè)化合物pka±2的范圍外，以獲得較好的pH值耐用性，因此如果酸性有機(jī)胺類(lèi)化合物酸性較弱，即pka較大（5以上）推薦使用較低pH值緩沖鹽抑制其解離，如果使用高pH值緩沖鹽，pH值需要在7以上，不利于色譜柱壽命。

如果酸性有機(jī)胺類(lèi)化合物酸性較強(qiáng)，即pka較?。?以下）可能難以使用低pH值緩沖鹽抑制其解離，如果極性較小可以嘗試高pH值緩沖鹽；但是一般這種情況該化合物極性都非常強(qiáng)，保留非常弱，使用高pH值很可能無(wú)法獲得適當(dāng)?shù)谋Ａ魰r(shí)間，在這種情況可能需要用到離子對(duì)試劑如四丁基銨鹽或者采用HILIC、離子交換柱等方法。如納譜分析ChromCore HILIC-Amide色譜柱。

三、堿性有機(jī)胺類(lèi)化合物

堿性有機(jī)胺類(lèi)化合物是反相HPLC方法開(kāi)發(fā)中最常見(jiàn)又最讓人痛苦的一類(lèi)化合物，有相關(guān)經(jīng)歷的讀者應(yīng)該立刻心領(lǐng)神會(huì)心有戚戚。最常見(jiàn)的是這類(lèi)化合物的峰拖尾、很寬，然后和相鄰峰分離非常差。所以該類(lèi)化合物的HPLC方法開(kāi)發(fā)是本文中重點(diǎn)闡述的內(nèi)容。

首先要說(shuō)明的是開(kāi)發(fā)該類(lèi)化合物反相HPLC方法所使用的色譜柱強(qiáng)烈建議使用封尾處理過(guò)的色譜柱，盡量選擇封尾處理比較好的品牌與型號(hào)。一般來(lái)說(shuō)，說(shuō)明書(shū)上說(shuō)明了采用二次封尾或者三次封尾的色譜柱，在堿性化合物峰拖尾上表現(xiàn)較好，如納譜分析ChromCore 120 C18色譜柱。

同上文的酸性有機(jī)胺類(lèi)化合物，堿性有機(jī)胺類(lèi)化合物因具有較強(qiáng)的電離傾向，需要使用緩沖鹽。堿性化合物對(duì)緩沖鹽的緩沖能力要求較高，一般來(lái)說(shuō)緩沖鹽濃度建議0.02mol/L以上。

緩沖鹽的pH值需要偏離待測(cè)化合物pka±2的范圍外，以獲得較好的pH值耐用性，因此如果堿性有機(jī)胺類(lèi)化合物堿性較弱，即pka較小（4以下）推薦使用較高pH值緩沖鹽抑制其解離，如果使用低pH值緩沖鹽，pH值需要在2以下，不利于色譜柱壽命。

如果堿性有機(jī)胺類(lèi)化合物堿性較強(qiáng)，即pka較大（5以上）可能難以使用高pH值緩沖鹽抑制其解離；一般這種情況該化合物極性都非常強(qiáng)，保留非常弱，使用低pH值很可能無(wú)法獲得適當(dāng)?shù)谋Ａ魰r(shí)間，在這種情況可能需要用到離子對(duì)試劑如烷基磺酸鈉或者采用HILIC、離子交換柱等方法，如納譜分析ChromCore HILIC-Amide色譜柱。